ההבדל בין אימונופלורסנציה לבין אימונוהיסטוכימיה | Immunofluorescence לעומת אימונוהיסטוכימיה

Anonim

ההבדל העיקרי - Immunofluorescence לעומת אימונוהיסטוכימיה

אבחון מחלות, אשר משתמש בשיטות ביולוגיות מולקולריות, הפך לאזור המתפתח של טכנולוגיית המעבדה הקלינית. הוא כולל את כל הבדיקות והשיטות כדי לזהות מחלה ולהבין את הגורם למחלה על ידי ניתוח DNA, RNA או ביטוי חלבונים באורגניזם. ההתקדמות המהירה באבחון מולקולרי אפשרו מחקר בסיסי על מחלות מדבקות ולא מידבקות. אלה משמשים כדי לקבוע שינויים ברצף או רמות ביטוי בגנים או חלבונים חיוניים המעורבים במחלה. Immunofluorescence (IF) ו אימונוהיסטוכימיה (IHC) הן שתי טכניקות בשימוש נרחב בביולוגיה של סרטן. אם הוא סוג של IHC שבו שיטת זיהוי הקרינה משמשת לניתוח נוגדנים חד שבטיים ופוליקלונליים, ואילו IHC משתמש בשיטות מבוססות כימיה כדי לזהות את הנוגדנים המונוקלונליים והפולייקלונליים. זהו ההבדל העיקרי בין IF ו- IHC.

-> ->

תוכן

1. סקירה והפרש מפתח

2. מה זה Immunofluorescence

3. מהי אימונוהיסטוכימיה

4. דמיון בין Immunofluorescence ו אימונוהיסטוכימיה

5. זה לצד זה השוואה - Immunofluorescence לעומת אימונוהיסטוכימיה טופס טבלאי

6. סיכום

מהו Immunofluorescence (IF)?

Immunofluorescence היא טכניקה איתור שבו נוגדנים המשמשים assay מסומנים באמצעות צבעים ניאון או חלבונים פלואורסצנטי לצורך זיהוי. נוגדנים משניים עם תוויות יכולים לגרום לאותות רקע לא רצויים; לכן, אם הטכניקה מבוססת על תיוג הנוגדן העיקרי עצמו כיום על מנת למנוע אותות לא רצויים במהלך איתור. באמצעות טכניקה זו, לא ספציפית מחייב בין הראשוני ואת נוגדן משני הוא מנע, וזה יותר מהיר כמו אין שלב הדגירה המשנית מעורבים. גם איכות הנתונים משופרת.

- איור: 01: כתמים immunofluorescence כפול עבור BrdU, NeuN, GFAP

פלואורוכרומים או צבעים ניאון הם תרכובות אשר יכול לספוג קרינה, עדיף קרינה סגולה אולטרה כי הוא מתרגש. כאשר החלקיקים מגיעים למצב הקרקע מהמדינה הנרגשת, הם פולטים קרינה הנלכדת ומוגדרת על ידי גלאי כדי ליצור ספקטרום.יש חשיבות רבה כי התווית ניאון הוא יציב ויציב עבור התגובה בפרט וזה צריך להיות מצומדות כראוי לנוגדן כדי להשיג תוצאות מדויקות. אחד fluorochromes בשימוש ביותר הוא isothiocyanate פלואורסצין (FITC), שהוא בצבע ירוק, עם הקליטה ואת פליטת שיא אורכי של 490 ננומטר ו 520 ננומטר, בהתאמה. Rhodamine, סוכן נוסף המשמש IF, הוא צבע אדום ויש לו קליטה נפרדת אורכי גל פליטה פליטה של ​​553 ננומטר ו 627 ננומטר.

-> ->

מהו אימונוהיסטוכימיה (IHC)?

IHC הוא שיטת בדיקה מולקולארית התאמן על מנת לזהות ולאשר את נוכחותו של האנטיגן בתא היעד. תא המטרה יכול להיות חלקיק מדבק, פתוגן חיידקי או תא סרטני ממאיר. IHC משתמש נוגדנים חד שבטיים ו polyclonal כדי לקבוע את נוכחותם של אנטיגנים נוכח על פני התא של תאים היעד. הטכניקה מבוססת על מחייב נוגדן אנטיגן. סמן זיהוי הוא מצומד לנוגדנים אלה על מנת לזהות את נוכחות או היעדר אנטיגן מסוים. סמנים אלה יכולים להיות סמנים כימיים כגון אנזימים, נוגדנים מתויגים fluorescently או נוגדנים רדיו שכותרתו.

איור 02: פרוסת עכבר המוח מוכתם על ידי אימונוהיסטוכימיה

היישום הפופולרי ביותר של IHC הוא ביולוגיה של תאים סרטניים כדי לזהות את נוכחותם של גידולים ממאירים, אבל זה משמש גם לאיתור מחלות זיהומיות.

מה הם הדמיון בין Immunluluorescence ו אימונוהיסטוכימיה?

Immunofluorescence ואימונוהיסטוכימיה להתקיים בתנאים במבחנה.

  • שתי הטכניקות מבוססות על נוגדנים אנטיגן
  • שתי טכניקות מהירות מאוד.
  • תוצאות של טכניקות לשעתקו.
  • לשניהם יש שיפור איכות הנתונים.
  • טכניקות אלה משמשים אבחון לסרטן ומחלות זיהומיות.
  • מה ההבדל בין Immunluluorescence ו אימונוהיסטוכימיה?

- diff מאמר בינוני לפני טבלה ->

Immunofluorescence לעומת אימונוהיסטוכימיה

אם היא טכניקה זיהוי שבו נוגדנים המשמשים assay מסומנים באמצעות צבעים ניאון או חלבונים ניאון לאיתור.

IHC היא טכניקה איתור שבו נוגדנים המשמשים assay מסומנים באמצעות כימיקלים או אלמנטים רדיואקטיביים לזיהוי. דיוק
דיוק גבוה יותר בטכניקה IF בהשוואה ל- IHC.
דיוק נמוך יותר ב- IHC. ספציפיות
אם הוא ספציפי יותר.
IHC פחות ספציפי. סיכום - Immunofluorescence לעומת אימונוהיסטוכימיה

מנגנונים מולקולריים הביאו לשינויים רבים בתחום הרפואה, והוליד שיטות בדיקה מולקולריות מתקדמות אשר הביאו מהפכות בתחום האבחון. המצאות אלה הובילו לזיהוי מהיר ומדויק של המחלה, ובכך לאפשר ניהול מוצלח של תרופות. טכניקות אלה משמשים גם פרמקולוגיה כדי למצוא את מטרות התרופות כדי לאשר את המאפיינים pharmacokinetic של התרופה במהלך חילוף החומרים של התרופה.IF ו- IHC הן שתי שיטות אבחון המבוססות על הקונספט של אנטיגן ונוגדן, למרות שמצב האבחנה בשתי הטכניקות שונה. IF משתמשת בעקרון הקרינה כדי לזהות את האנטיגן ו- IHC משתמשת ברעיון של הצמדה כימית כדי לזהות את האנטיגן. זה ההבדל בין IF ו- IHC.

הורד את גרסת PDF של Immunofluorescence לעומת אימונוהיסטוכימיה

אתה יכול להוריד גרסת PDF של מאמר זה ולהשתמש בו למטרות לא מקוון לפי הערה ציטוט. אנא הורד גרסת PDF כאן ההבדל בין Immunofluorescence ו אימונוהיסטוכימיה.

הפניות:

1. אאוקי, ולריה, ואחרים. "ישיר ועקיף immunofluorescence. "Anais Brasileiros de Dermatologia, SociedadeBrasileira de Dermatologia, זמין כאן. תאריך כניסה 25 אוגוסט 2017.

2. Duraiyan, Jeyapradha, et al. "יישומים של אימונוהיסטוכימיה. "Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow פרסומים & מדיה Pvt בע"מ, אוגוסט 2012, זמין כאן. גישה 25 אוגוסט 2017.

Image באדיבות:

1. "מכתים immunofluorescence כפול עבור BrdU, NeuN ו GFAP" על ידי MA M, MA Y, Yi X, Guo R, Zhu W, מאוורר X, Xu G, פריי WH 2, ליו X. - משלוח intranasal של שינוי גורם הצמיחה beta1 ב עכברים לאחר שבץ מפחית נפח infarct ומגביר neurogenesis באזור subventricular; PMID 19077183 (CC BY 2. 0) via Commons Wikimedia

2. "Hypothalamus של רקמת עכברים מוכתמת על ידי ABC- אימונוהיסטוכימיה" מאת zabbn - עבודה משל עצמו (CC BY-SA 3. 0) via Commons Wikimedia