ההבדל בין דף SDS לבין כתם המערבי | SDS עמוד לעומת כתם המערבי

ההבדל העיקרי - SDS עמוד לעומת כתם המערבי

המערבי סופג היא טכניקה אשר מזהה חלבון מסוים מדגם חלבון. טכניקה זו מבוצעת באמצעות מספר שלבים עיקריים: ג 'ל אלקטרופורזה, סופג, הכלאה. sodium dodecyl sulfate polyacrylamide ג'ל אלקטרופורזה (SDS Page) הוא סוג של טכניקה אלקטרופורזה ג'ל המשמש להפריד חלבונים לפי הגדלים שלהם (משקולות מולקולריים). כתם המערבי הוא גיליון מיוחד של קרום סופג המשמש להעברת דפוס זהה של חלבונים בדף SDS. ההבדל העיקרי בין דף SDS לבין כתם המערבי הוא כי SDS Page מאפשר הפרדת חלבונים בתערובת בעוד כתם המערבי מאפשר זיהוי וכימות של חלבון מסוים מתערובת. שניהם שימושיים בחקר ניתוח חלבון.

-> ->

תוכן

1. סקירה והפרש מפתח

2. מהו SDS Page

3. מה כתם המערבי

4. השוואה של הצד השני - SDS עמוד לעומת כתם המערבי

5. סיכום

מהו דף SDS?

SDS עמוד הוא טכניקה אלקטרופורזה ג'ל המשמש ההפרדה חלבון. זה נפוץ ביוכימיה, גנטיקה, פלילי וביולוגיה מולקולרית. לאחר החלבונים מופקים מן המדגם, הם מופעלים על ג'ל המורכב SDS ו polyacrylamide. SDS הוא חומר ניקוי anionic אשר משמש ליניאריזציה חלבונים (חלבונים להכחיש) ולהעביר מטען שלילי חלבונים ליניארי פרופורציונלי המסה המולקולרית שלהם. Polyacrylamide הופך את התמיכה המוצקה של הג'ל. חלבונים מפוקפקים אשר טעונים שלילי נודדים לקראת סוף חיובי של המכשיר דרך הג'ל. על פי גדלים של חלבונים, מהירויות נודדות שונים בין חלבונים ההפרדה מתרחשת. לכן, דף SDS הוא שימושי עבור ההפרדה של חלבונים בודדים על פי גדלים שלהם.

הכנת ג'ל polyacrylamide לחלוקת חלבונים היא צעד מכריע SDS עמוד. הריכוז הנכון של polyacrylamide וסוג של הצלב המקשר סוכן בשימוש חזק להשפיע על המאפיינים הפיזיים של הג'ל, מה שהופך את ההפרדה בפועל של חלבונים שונים. גודל הנקבוביות של הג'ל צריך להיות מנוהל כראוי עבור הפרדה יעילה. עם זאת, SDS Page נחשב טכניקה ההפרדה חלבון ברזולוציה גבוהה.

SDS טכניקה עמוד יש מגבלה גדולה בניתוח חלבון. מאז SDS denatures חלבונים לפני ההפרדה, זה אינו מאפשר זיהוי של פעילות אנזימטית, אינטראקציות מחייב חלבון, cofactors חלבון, וכו '

איור 01: SDS דף

מהו כתם המערבי?

טכניקה סופג המערבי מאפשר זיהוי של חלבון מסוים מתערובת חלבונים ומדידה של כמות ומשקל מולקולרי של החלבון. כתם המערבי הוא הממברנה בשימוש במהלך הליך סופג כדי לקבל את תמונת המראה של דפוסי חלבון של ג'ל SDS- polyacrylamide. הממברנה המשמשת המערבי סופג מורכב בעיקר של nitrocellulose או polyvinylidene difluoride (PVDF). הממברנה עם החלבון המועבר ניתן להשתמש כדי לזהות את החלבון הרצוי. זה דורש נוגדן באיכות גבוהה עבור זיהוי של החלבון הרצוי על ידי הכלאה. הנוגדן נקשר לאנטיגן הספציפי שלו ומגלה את נוכחותו של האנטיגן הרצוי שהוא חלבון.

העברת חלבונים מ SDS polyacrylamide ג'ל כתם המערבי מבוצע על ידי electroblotting. זוהי שיטה יעילה ומהירה אשר גורם חלבונים electrophorese מתוך הג'ל ולעבור על הממברנה ניטרוצלולוזה (כתם המערבי).

איור 02: כתם המערבי

מה ההבדל בין דף SDS לבין כתם המערבי?

- דיפר סעיף התיכון לפני טבלה ->

SDS עמוד לעומת כתם המערבי
SDS דף היא טכניקה אלקטרופורזה ג'ל.	כתם המערבי הוא טכניקה אשר מבוצעת על קרום כדי לזהות חלבון מסוים מתערובת.
השתמש
דף SDS מאפשר הפרדה של חלבונים בהתאם לגדלים שלהם.	כתם המערבי מאפשר העברת חלבונים על ג'ל SDS הדף מבלי לשנות את תבניתו & מאפשר הכלאה עם נוגדנים ספציפיים.
חסרונות
חלבון denaturation, עלות גבוהה, ונוכחות של חומרים נוירוטוקסין הם החסרונות של טכניקה זו.	טכניקה זו היא זמן רב ודורש טוב מנוסה אישית ותנאים ספציפיים מבוקרת.

סיכום - SDS עמוד לעומת כתם המערבי

SDS דף כתם המערבי הן שתי שיטות המעורבות ניתוח חלבון. דף SDS מאפשר הפרדה קלה של חלבונים על ג'ל על פי המשקל המולקולרי שלהם. כתם המערבי עוזר לאשר את נוכחות וכמות של חלבון מסוים באמצעות הכלאה עם נוגדנים ספציפיים. זהו ההבדל בין דף SDS לבין כתם המערבי.

הפניות:

1. בלאנצ'ר, ג ', וא' ג 'ונס. "SDS -PAGE וטכניקות סופג המערבי. "שיטות ברפואה מולקולרית. U. S. הספרייה הלאומית לרפואה, n. ד. אינטרנט. 27 מרץ 2017

2. נובקובסקי, אנדרו ב ', ויליאם ג' ווביג ודוד ה 'פיטרינג. "Native SDS-PAGE: הפרדה גבוהה electrophoretic ברזולוציה של חלבונים עם שימור של נכסים הילידים כולל יונד מתכת Iound. "Metallomics: משולב ביומטרי המדע. הספרייה הלאומית לרפואה, מאי 2014. 27 מרץ, 2017.

Image באדיבות:

1. "SDS-PAGE Electrophoresis" על ידי Bensaccount באנגלית ויקיפדיה (CC BY 3. 0) via Commons Wikimedia

2. "כתם המערבי 114A" מאת Amanthabagdon - עבודה עצמאית (Public Domain) via Commons Wikimedia