ההבדל בין ג'ל אלקטרופורזה לבין SDS עמוד | ג'ל אלקטרופורזה לעומת SDS עמוד

Anonim

ההבדל העיקרי - ג'ל אלקטרופורזה לעומת SDS עמוד

ג'ל אלקטרופורזה היא טכניקה המפריד מקרומולקולות בתחום חשמלי. זוהי שיטה נפוצה בביולוגיה מולקולרית להפריד בין דנ"א, רנ"א וחלבונים מתערובות בהתאם לגודל המולקולרי שלהם. עמוד SDS הוא סוג של ג'ל אלקטרופורזה אשר משמש כדי להפריד חלבונים מתערובת חלבונים מבוסס על הגדלים שלהם. ג'ל אלקטרופורזה הוא מונח המשמש להתייחסות לטכניקה הרגילה המיושמת עבור דנ"א, רנ"א והפרדת חלבון בעוד SDS Page הוא סוג אחד של אלקטרופורזה ג'ל. זהו ההבדל העיקרי בין ג'ל אלקטרופורזה לבין SDS Page.

-> ->

תוכן

1. סקירה והפרש מפתח

2. מה זה ג'ל אלקטרופורזה

3. מה זה SDS? השוואה בין-צדדית - ג'ל אלקטרופורזה נגד SDS <<<5 5. סיכום

מהו ג'ל אלקטרופורזה?

ג'ל אלקטרופורזה היא טכניקה נפוצה בשימוש במעבדות להפריד מולקולות טעונות כגון DNA, RNA, חלבונים, וכו 'מן התערובות שלהם. ג'ל משמש ג 'ל אלקטרופורזה. זה פועל כמו מסננת מולקולרית. ישנם שני סוגים של ג'לים המשמשים ג'ל אלקטרופורזה כלומר agarose ו polyacrylamide. בחירה של ג'ל הכנה ג'ל הם גורמים חשובים כדי להיחשב ג 'ל electrophoreses מאז גודל הנקבוביות של ג'ל צריך להיות מניפולציה בזהירות עבור הפרדה טובה של מולקולות באמצעות ג'ל אלקטרופורזה. ג'ל אלקטרופורזה יש שדה חשמלי מחובר לשני הקצוות של הג'ל. קצה אחד של ג'ל מראה חיוב חיובי בעוד הקצה השני הוא טעונה שלילית.

DNA ו- RNA הם מולקולות טעונות שליליות. ברגע שהם נטענים לתוך הג'ל מן הקצה השלילי של הג'ל ומוחלים על השדה החשמלי, הם נודדים דרך הנקבוביות ג'ל לכיוון סוף טעון חיובי של ג'ל. מהירות ההגירה תלויה במטענים ובגודל המולקולה. מולקולות קטנות יותר נודדות בקלות דרך נקבוביות הג'ל מאשר מולקולות גדולות יותר. לפיכך, מולקולות קטנות יותר עוברות מרחק רב דרך הג'ל והמולקולות הגדולות יותר עוברות מרחק קצר. כדי לבחון את הנסיעה של מולקולות על הג'ל, סוגים מיוחדים של צבעים משמשים. השדה החשמלי מוחל על פרק זמן מסוים ונעצר כדי למנוע את אובדן המולקולות ולשמור על המולקולות בעמדותיהם הנעות. להקות שונות ניתן לראות את הג'ל.להקות אלה מייצגות את המולקולות בגדלים שונים. לפיכך, ג'ל אלקטרופורזה הוא שימושי כדי להבדיל מולקולות על פי הגודל שלהם.

->

ג'ל אלקטרופורזה משולבת בטכניקות שונות כמו טכניקה הכנה בביולוגיה מולקולרית כגון PCR, RFLP, שיבוט, רצף DNA, דרום סופג, מיפוי הגנום, וכו '

איור 01: Agarose ג'ל אלקטרו-מכניקה

מהו SDS Page?

סודיום dodecyl גופרתי polyacrylamide ג'ל אלקטרופורזה

(SDS Page) הוא סוג של אלקטרופורזה ג'ל המשמש להפריד חלבונים. כאשר ג'ל אלקטרופורזה משמש חלבונים נפרדים, טיפולים מיוחדים נדרשים מאז חלבונים אינם טעונים שלילי כמו DNA ו- RNA ולא להגר לקראת סוף חיובי או סוף שלילי. לפיכך, חלבונים הם denatured ומצופה עם מטען שלילי לפני ג'ל אלקטרופורזה. זה נעשה באמצעות דטרגנט הנקרא נתרן dodecyl sulfate (SDS). ג'ל אלקטרופורזה המשתמשת SDS וג'ל polyacrylamide עבור המדיום התומך ידוע בשם SDS עמוד. טכניקה זו משמשת בדרך כלל ביוכימיה, גנטיקה, פלילי וביולוגיה מולקולרית.

במהלך SDS Page, חלבונים מעורבים עם SDS. SDS מגלה חלבונים לצורה ליניארית ומעילים אותם עם מטען שלילי פרופורציונלי המסה המולקולרית שלהם. בשל המטען השלילי, מולקולות חלבון נודדות לכיוון המטען החיובי של הג'ל ומפרידות לפי ההמונים המולקולריים שלהן. ב - SDS Page, polyacrylamide משמש כתמיכה מוצקה עבור הג 'ל. ההפרדה בפועל של החלבונים תלויה בעיקר במאפיינים של ג'ל. לפיכך, הכנה ג'ל polyacrylamide צריך להיעשות בזהירות ריכוזים נכונה של polyacrylamide יש להשתמש. ג 'ל Polyacrylamide להראות ברזולוציה גבוהה יותר מאשר agarose ג'לים. לפיכך, SDS עמוד נחשב טכניקה ברזולוציה גבוהה עבור הפרדת חלבון. SDS Page הוא סוג של electororesis ג'ל denaturing. יש לו מגבלה גדולה בניתוח חלבון. מאז SDS denatures חלבונים לפני ההפרדה, הוא אינו מאפשר זיהוי של פעילות אנזימטית, אינטראקציות מחייב חלבון, cofactors חלבון, וכו '

איור 02: SDS דף

מה ההבדל בין ג'ל אלקטרופורזה לבין SDS עמוד?

- דיפר סעיף ביניים לפני טבלה ->

ג'ל אלקטרופורזה לעומת SDS עמוד

ג'ל אלקטרופורזה היא שיטה המבוצעת להפריד מקרומולקולות באמצעות שדה חשמלי.

SDS Page הוא טכניקה ג'ל אלקטרופורזה ברזולוציה גבוהה המשמשת להפריד חלבונים על בסיס המסה שלהם.

ג'ל לרוץ זה יכול להתבצע בצורה אופקית או אנכית.
SDS Page תמיד פועל אנכית.
בסיס להפרדה הפרדה מתרחשת לפי המטען והגודל.
הפרדת חלבונים מתרחשת על פי המסה והמטען.
רזולוציה ג'ל אלקטרופורזה של Agarose יש רזולוציה נמוכה וג'ל אלקטרופורזה פוליאקרילאמיד יש רזולוציה גבוהה יותר
SDS Page יש רזולוציה טובה יותר.
Denaturation ג'ל אלקטרופורזה כולל טכניקות denaturing ולא denaturing.
SDS Page מכילה חלבונים לפני הפרידה.
סיכום - ג'ל אלקטרופורזה לעומת SDS Page ג'ל אלקטרופורזה היא טכניקה נפוצה המשמשת הפרדה וניתוח של דנ"א, RNA וחלבונים על בסיס הגודל שלהם תשלום. ישנם שני סוגים עיקריים של ג'ל אלקטרופורזה כלומר אלקטרופורזה ג'ל agarose ו electroporesis ג'ל polyacrylamide. Agarose ג'ל משמשים בעיקר הפרדת חומצה גרעין; כאשר נדרשת רזולוציה גבוהה יותר, ג 'ל polyacrylamide משמשים. SDS Page הוא סוג של ג'ל אלקטרופורזה נפוץ להפריד תערובות מורכבות של חלבונים. זה נחשב טכניקה ההפרדה חלבון ברזולוציה גבוהה. זה ההבדל בין אלקטרופורזה ג'ל לבין SDS עמוד.

הפניות:

1. נובקובסקי, אנדרו ב ', ויליאם ג' ווביג ודוד ה 'פיטרינג. "Native SDS-PAGE: הפרדה גבוהה electrophoretic ברזולוציה של חלבונים עם שימור של נכסים הילידים כולל יונד מתכת Iound. www. ncbi. nlm. ניה. gov. נ., מאי 2014. 7 אפריל 2017

2. Stellwagen, ננסי C. "אלקטרופורזה של דנ"א ב agarose ג'לים, ג'ל polyacrylamide ובפתרון חופשי. "אלקטרופורזה. הספרייה הלאומית לרפואה, יוני 2009. 07 אפריל 2017

Image באדיבות:

1. "Gelelektrophoreseapparatur" (CC BY-SA 3. 0) via Commons Wikimedia

2. "דנ"א Agarose ג'ל אלקטרופורזה" על ידי בית הספר למשאבים טבעיים מ אן ארבור - מעבדה DNA (CC BY 2. 0) באמצעות Commons Wikimedia